传统上，根据胞外或表面表达的标志物不同，流式细胞术可用于鉴定多种异质细胞库里的不同细胞类型，这种应用通常称为免疫表型分型。然而，这项技术还可轻松地应用于胞内靶标检测，并可成功地应用于复杂信号转导事件的研究。
因此，结合其检测细胞表面标记物的能力，胞内流式细胞术成为一个强大的平台，可在不同表型的细胞群内检测单细胞水平的信号转导网络。
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细胞过程由复杂而动态的细胞内信号转导网络控制。表面受体通过修饰细胞质蛋白质将信息传递到细胞内。这些修饰包括磷酸化、甲基化和乙酰化，它们控制了广泛的细胞功能，包括生长、发育和细胞凋亡。信号转导网络中断常常会导致疾病。
为了了解正常以及病理条件下的信号转导过程，有必要对信号转导蛋白进行鉴定和定量。流式细胞术是完成此任务的理想选择。流式细胞仪是一种基于激光的技术，广泛用于使用针对表面标志物的抗体对细胞进行表型分析。它还可以使用检测信号传导蛋白、其翻译后修饰、表观遗传学修饰和下游转录因子的抗体，同时分析多种细胞内靶标。
细胞内流式细胞术的第一步是使用甲醛固定细胞，从而可固定蛋白质并保留瞬时信号转导事件。然后用甲醇或去垢剂对细胞进行通透，使抗体能够进入细胞内空间。最佳固定和通透条件取决于靶标表位的位置和生物化学，应仔细考虑这些因素以确保成功检测抗原，尤其是在同时染色表面和细胞内蛋白质时。由于可以使用不同荧光标记的抗体识别多种信号转导蛋白和表面抗原，因此流式细胞术可以轻松地表征不同表型群体中单细胞水平的信号分布。
这使得能够表征细胞内靶标之间的关系，并能够检测异质样本中稀有细胞群的信号转导事件。这些蛋白靶标的多重分析节省了时间和资源，同时产生了数据丰富的结果，使细胞内流式细胞术成为了揭示细胞信号转导复杂性的宝贵工具。有关流式细胞术验证产品和优化实验步骤的更多信息，请访问 www.cellsignal.com/flowcytometry