要检测免疫细胞的激活，使用磷酸化特异性抗体检测胞内信号转导，结合用表面标记物检测免疫表型是一个理想的做法。由于流式细胞术在单细胞水平下检测活动的独特能力，“Phospho Flow”可用来检测共刺激信号转导等过程期间的罕见信号转导活动，并操纵检查点抑制。但在流式细胞术实验步骤中，结合胞外和胞内抗体可能存在技术挑战。
本次演讲的主题包括：
- 较小的实验步骤变化会如何影响流式细胞术结果；
- 使用针对 T 细胞激活和天然免疫的磷酸化特异性抗体组合优化流式细胞术实验步骤的例子；
- 有关在实验设计中结合表型标记物与磷酸化特异性胞内靶标的指导；
- 探讨固定和通透试剂盒的使用。