为什么使用嵌合抗体进行多重分析？

您可能早就说过类似的话：“给我任何抗体都行，就是不要兔抗体！”虽然兔抗体因其高亲和力和特异性而受到称赞，但在单次免疫荧光 (IF) 实验中使用多个兔试剂可能颇具挑战性。如果您的研究需要同时观察两个或以上的蛋白靶标，那么在多重分析中使用多个兔单克隆可能意味着要在实验灵活性和灵敏度之间做出牺牲——或者更糟的是，可能需要彻底修改实验步骤才能研究您感兴趣的所有标记物。

使用靶向 CD68 和 TMEM119 的嵌合抗体对来自阿尔茨海默病淀粉样蛋白小鼠模型的固定冷冻脑组织进行免疫荧光分析

使用嵌合 CD68（猫，绿色）和 TMEM119（小鼠，品红色）抗体对阿尔茨海默病淀粉样蛋白小鼠模型的固定冷冻脑组织进行免疫荧光分析，以评估小胶质细胞的激活状态。使用抗兔 Fc 特异性二抗检测 β-Amyloid (D54D2) XP^® Rabbit mAb #8243（红色）。蓝色 = ProLong Gold Antifade Reagent with DAPI #8961。

如果您能够继续使用您熟悉和信赖的抗体，并且是来自另一个宿主物种，那会怎么样？这正是 CST^® 嵌合抗体的优势所在。我们的重组嵌合抗体产品组合可以轻松融入您现有的工作流程，且无需添置新仪器，即可实现最多四重免疫荧光检测。

什么是单克隆嵌合抗体？

重组嵌合抗体是一种经过工程改造的单克隆抗体，它将亲本抗体（本例中为兔）的部分序列与另一物种（如小鼠、马或猫）的序列片段相结合。与所有重组单克隆抗体一样，嵌合体是使用体外培养和 DNA 克隆技术制备，无需使用动物。

CST 嵌合抗体图_马、猫、小鼠拷贝简而言之，CST 嵌合抗体将您熟悉且信赖的高性能抗体克隆，采用新的宿主物种进行重新改造。其结果是重组单克隆抗体具有与原始兔克隆相同的特异性和性能，并且可以在多重免疫荧光实验中实现无缝协同。

这为您现有的工作流程开辟了一个新的可能性。

为什么使用嵌合抗体进行多重分析？

在神经科学研究中，使用来自不同动物宿主的初级单克隆抗体进行多重分析，是免疫荧光实验的黄金标准。原因如下：

轻松兼容现有工作流程

您无需更换任何设备、缓冲液或实验步骤。嵌合抗体可与您现有的实验系统和多重分析方法完美兼容，非常适合高内涵分析。它们沿用与亲本兔克隆相同的免疫荧光实验步骤，使您能够轻松将其整合到实验中，而无需额外的学习成本。

能够叠加更多颜色

CST 嵌合抗体提供马 (IgG4)、猫 (IgG1) 和小鼠 (IgG2a) 等宿主物种可供选择，使您能够扩展多重分析组合，在同一样品中检测更多靶标。由于这些抗体可通过偶联四种不同荧光团的物种特异性二抗进行检测（见下表），您可以放心拓展实验，而无需担心交叉反应。

使用针对 CD11b/ITGAM（小鼠，绿色）和 S100B（猫，红色）的嵌合抗体进行免疫荧光分析，以便在阿尔茨海默病淀粉样小鼠模型中，使用固定冷冻的脑组织识别淀粉样斑块周围的星形胶质细胞和与疾病相关的小胶质细胞。使用抗兔 Fc 特异性二抗检测兔一抗 HS1 (D5A9) XP^® Rabbit mAb #3892（灰色）。蓝色 = ProLong Gold Antifade Reagent with DAPI #8961。

可视化检测低丰度靶标

直接偶联抗体是一种便捷的多重检测方案，但对于表达水平较低的靶标，其信号强度可能不足。与荧光素偶联的二抗一起使用时，嵌合抗体具有与原始 CST 克隆相同的高亲和力和低背景，并且信号优于直接荧光团偶联的抗体。

经济高效

对于多达四个靶标的免疫荧光实验，嵌合抗体是一种简便且经济高效的解决方案。不同于需要依赖专用设备、大量优化步骤以及昂贵的寡核苷酸或条形码试剂的复杂高通量系统，嵌合抗体可直接与您现有的实验仪器和标准二抗配合使用。这可让您无需承担额外培训、复杂试剂或专用成像平台的费用负担。此外，嵌合抗体还提供方便且经济实惠的 20 µL 的小规格。这意味着您可以根据实验需求，仅购买足以进行初步实验的抗体量。

如何在您的工作流程中使用嵌合抗体

在标准免疫荧光实验步骤中加入嵌合抗体非常简单。

在固定并透化细胞或组织后，您可以在一抗孵育步骤中同时加入嵌合抗体和兔一抗。随后洗去一抗后，加入相应的已偶联荧光团的物种特异性二抗。二抗孵育结束后，细胞或组织可按照标准免疫荧光实验步骤进行封片。

但有一点需要特别注意：由于嵌合抗体与其兔亲本克隆具有相同的抗原结合区，因此您需要使用不同物种的 Fc 特异性二抗以避免交叉反应。

什么是 Fc 特异性二抗？Fc 特异性二抗是一类专门结合一抗 Fc 区（即 Y 形抗体分子的“柄”部）的二抗。由于嵌合抗体的部分结构仍保留来自原始亲本克隆的兔宿主结合位点，因此会被泛兔二抗识别，从而产生错误信号。通过使用 Fc 特异性二抗，您可以清晰成像并区分不同宿主来源的信号，避免意外的信号重叠。

下表列出了与 CST 嵌合抗体兼容的二抗链接，这些二抗提供四种不同的激发光波长可供选择。

**兼容的二抗**
	激发光波长 (nm)
		488	555	594	647
反应性	猫嵌合体	Goat Anti-Feline IgG, Fc Fragment Antibody (FITC Conjugate) #39075	--	Goat Anti-Feline IgG, Fc Fragment Antibody (Texas Red Conjugate) #99224	Goat Anti-Feline IgG (H+L) Antibody (Alexa Fluor^® 647 Conjugate) #76333
	马嵌合体	--	Goat Anti-Horse IgG, Fc Fragment Antibody (TRITC Conjugate) #70496	Goat Anti-Horse IgG, Fc Fragment Antibody (Texas Red Conjugate) #55182	--
	小鼠嵌合体	Goat Anti-Mouse IgG2a Antibody (Alexa Fluor^® 488 Conjugate) #94207	Goat Anti-Mouse IgG2a Antibody (Alexa Fluor^® 555 Conjugate) #51761	Goat Anti-Mouse IgG2a, Fc gamma Specific Antibody (Alexa Fluor^® 594 Conjugate) #90440	Goat Anti-Mouse IgG2a Antibody (Alexa Fluor^® 647 Conjugate) #30135
	兔 Fc	Goat Anti-Rabbit IgG, Fc Fragment Antibody (FITC Conjugate) #86426	Goat Anti-Rabbit IgG, Fc Fragment Antibody (Alexa Fluor^® 555 Conjugate) #25363	Goat Anti-Rabbit IgG, Fc Fragment Antibody (Alexa Fluor^® 594 Conjugate) #70872	Goat Anti-Rabbit IgG, Fc Fragment Antibody (Alexa Fluor^® 647 Conjugate) #46023

例如，如果您使用兔一抗和猫嵌合抗体，则应使用抗兔 Fc 二抗检测兔一抗，使用抗猫二抗检测嵌合抗体，如下所示。这样可确保每种二抗仅与其对应的目标结合，从而消除产生错误信号的可能。

使用 PSD95 (D27E11) Horse Chimeric mAb #19622（灰色）、MAP2 (D5G1) XP Rabbit mAb #8707（绿色）、Synaptophysin (D8F6H) Feline Chimeric mAb #76788（红色）和 ProLong Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）对固定冷冻的小鼠小脑进行免疫荧光分析。使用 Goat Anti-Rabbit IgG, Fc Fragment Antibody (Alexa Fluor^® 647 Conjugate) #46023 检测兔一抗 MAP2 (D5G1) XP® Rabbit mAb #8707。

您可以信赖的抗体

一致、可靠的抗体对于准确的结果至关重要。因此，每一支 CST 嵌合抗体均与其亲本克隆进行对照验证，确保延续您对 CST 卓越性能的信任。当与优质 CST 二抗配合使用时，CST 嵌合抗体能为您带来始终如一、可重复的结果——无论是第一次，还是每一次。

自 2025 年 10 月起，所有可供选购的产品均已通过在新鲜冷冻组织上进行的免疫荧光验证。目前，这些抗体除了提供标准甘油基配方，还提供无载体蛋白、不含 BSA 和定制浓度的版本，并支持批量采购。

您无需花费时间学习不熟悉的实验步骤或新仪器，即可获得深入、可靠的结果。让 CST 嵌合抗体助您通过熟悉且简单的多重实验得到结果，从而专注于科学探索本身。

其他资源

本博客文章由 CST 内容营销经理 Alexandra Foley 参与撰写。25-NDG-41450

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