PTMScan 蛋白质组:检测和定量翻译后修饰肽
蛋白翻译后修饰 (PTM) 可调控细胞生长、发育和疾病生物学的各个方面。对这些 PTM 进行蛋白质组分析已成为更好地理解细胞信号转导的核心。目前的蛋白质组方法和仪器能够在一次实验中检测数千条肽。Cell Signaling Technology 的 PTMScan 蛋白质组方法将基于抗体的富集方法与液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 相结合,可以用来检测和定量翻译后修饰肽。产品和服务可用于分析细胞系、组织、异种移植物或其它生物材料中的蛋白磷酸化、乙酰化、泛素化、甲基化、琥珀酰化以及半胱天冬酶裂解活化 (PTMScan Discovery)。服务还专为靶向和深入覆盖关键信号转导通路而设计 (PTMScan Direct)。PTMScan 方法已成功应用于生物标记物发现、药物开发和各项研究,以更好地了解细胞信号转导。
使用泛素组残迹免疫沉淀、nLC-MS/MS 和等量异位标签进行多重定量泛素化组分析
近来,由于质谱仪和试剂的发展,大规模多重定量蛋白质组实验已变得更易于进行。如今,通过使用等量异位标签(例如串联质谱标签),在 1.5 天的分析中,通常可在 10 份实验样品中定量超过 8,000 个蛋白。但到目前为止,细胞泛素化组分析始终受限于一次实验中可多重分析的样品数。本次网络研讨会将重点介绍样品制备方法,包括采用 PTMScan 泛素残迹基序抗体 (Cell Signaling Technology) 进行免疫沉淀,以及采用等量异位标签标记生成的肽。科学家还将讨论可准确分析细胞泛素化组的仪器方法(如同步前体选择 MS3 [SPS-MS3])。另外,科学家也将重点介绍这种方法的应用,即在使用 Bortezomib 处理后,团队可在 10 个定量通道里同时定量 15,000 多个泛素化位点的变化。
演讲嘉宾:
Matt P. Stokes 博士
蛋白质组团队首席科学家
Cell Signaling Technology, Inc.
Christopher Michael Rose
博士后研究员
哈佛医学院 Gygi Lab