细胞过程：什么是细胞活性？如何衡量？

培养细胞的健康是您实验成功的关键。您是否曾对敲低、药物处理或培养条件的实验结果感到兴奋，却在之后发现这些作用发生了偏差，原因竟然是您样本中死亡细胞的数量？在您的检测中测量和比较细胞活性很重要，无论它在您的实验中是您所追求的数据还是重要控制措施。

什么是细胞活性？

细胞活性是指样本群体中健康细胞的比例。测量活性对于确定实验条件下细胞生理状态是必须的。细胞活性受环境因素影响，包括细胞培养参数的改变、接触药物和生长因子以及对多种疾病状态的反应。

例如，癌细胞表现出增强的活性，这促进它们异常增殖并逃避细胞凋亡，而神经退行性和其他组织退行性疾病则以进行性细胞损失为特征。损伤和感染也会对细胞存活产生负面影响，导致坏死或凋亡细胞死亡。因此，细胞健康与疾病之间的关键联系强调了在不同实验背景和模型系统中测量细胞活性的必要性。

如何测量细胞活力 

我们已经开发了多种技术来满足这一目的，即通过各种实验平台测量细胞活性。活性测定可以根据它们调查的基础原理机制进行分组，包括细胞增殖、质膜完整性、代谢活性和线粒体功能。

除了提供细胞群体总体健康状况的快照，还可以定制检测来确定活性受损时细胞死亡的方法 — 通过细胞凋亡或坏死。

XTT 测定法

XTT 测定法是测量细胞活性的代谢测试的一个示例。在健康细胞中，XTT 被线粒体酶转化为橙色甲臜染料。然后，使用在 450 纳米处检测到的相对吸光度来估计活细胞数量。这种方法的一个优点是其简单性 — 因为它不需要细胞固定、通透或二次检测方法 — 并且能够在分析后继续检查细胞。

有关如何使用我们的 XTT Cell Viability Assay Kit #9095 的更多详细信息，请查看 XTT 细胞活性检测实验步骤。

C2C12 细胞按不同密度接种在 96 孔板上，并孵育过夜。平板中加入 XTT Cell Viability Kit #9095 检测溶液来孵育细胞。在 1.0、2.0、3.0、4.0 和 5.0 小时测量 450 nm 处的吸光度。

Resazurin 测定

活性代谢测试的另一个例子是 Resazurin 测定。添加到细胞培养物中后，在健康细胞中，刃天青试剂通过脱氢酶还原成为荧光试卤灵，且试卤灵的量与样品中的活细胞成比例。与 XTT 检测类似，刃天青检测中使用的细胞可以继续用于下游分析。

查看 Resazurin Cell Viability Kit 的实验步骤，了解有关如何使用 Resazurin Cell Viability Kit #11884 的更多详细信息。

活/死细胞计数检测

活/死细胞计数检测是评估细胞活性的另一种常用方法。这些检测使用细胞通透性活体染料、细胞不通透染料或两者组合，以同时标记一个群体中的活细胞和死细胞。例如，台盼蓝是一种偶氮染料，无法穿透细胞膜，因此不会从健康细胞中排出。但是，膜损坏的死亡细胞吸收台盼蓝，从而能够使用血细胞计数器计数死亡（蓝色）和存活（无色）细胞的数量。

TUNEL 检测

多种方法如末端脱氧核苷酸转移酶 dUTP 缺口末端标记 (TUNEL) 测定法 也可用于检测正经历程序性细胞死亡的细胞。该测定法使用与荧光团偶联的修饰 dUTP 来标记片段化 DNA 的 3'OH 末端，这种末端是凋亡性细胞的标志。TUNEL 测定法灵活，因为在与基于抗体的测定法（如免疫组织化学、流式细胞术和免疫荧光）多路复用时，用户可以在不同的荧光团选项之间选择。

使用 TUNEL Assay Kit #25879 （荧光，488 nm）（绿色）对石蜡包埋的人结肠癌组织进行共聚焦分析，然后用 Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb #9664 （红色）和 DAPI #4083（蓝色）进行染色。

CST 提供三种 TUNEL 试剂盒，它们稳健、简单且易用，可在一天内对培养的细胞、组织和石蜡包埋样本提供结果。

使用 IHC 测定细胞活性

已开发出检测细胞活性的免疫组织化学 (IHC) 方法。这种方法通常用于确定蛋白质的时间分布及其在健康与病变组织中的表达模式，以及确定发生细胞死亡且同时保持 完整组织切片细胞架构的细胞区域。€‚尤其是，细胞增殖（包括 Ki-67 或 PCNA）或凋亡（包括裂解的 Caspase-3 和 PARP）的标记物，通常通过 IHC 进行定量分析。

其他资源：

• 若想更深入讨论这些概念和细胞活性以及适用的检测，请访问我们关于细胞死亡资源的网页。
• 要了解有关细胞活性和用于检测它的测定法的更多信息，请访问以下资源：细胞增殖、代谢状态和细胞死亡概要