保障 ELISA 数据的质量：确保 ELISA 批间可重复性

即用型 ELISA 试剂盒可通过消除优化需求简化您的研发工作流程。然而，至关重要的是，您选择的 ELISA 试剂盒展现出高度批间可重复性，以便您如期持续取得进展。如果 ELISA 试剂盒批号在长期实验期间中途变更，您需要确信新批次将跟老批次表现相当，产生相似的信号/空白比且生成了显示任何测定法间变异均落入可接受范围内的百分变异系数 (%CV) 值。

抗体是 ELISA 试剂盒的核心组分，它密切关联于可重复性危机——即人们正日益认识到不能重复许多科学实验的结果。解决这个问题要求研究人员谨慎选择产品，并且要求抗体制造商确保只有最高质量、经过最严格验证的产品才上市。至关重要的是，抗体应对其靶标表现出高度特异性，并应经证明在产品数据表中规定的应用中发挥作用。

在 CST，开发和发布抗体时我们恪守 Hallmarks of Antibody Validation^™，以确保您获得自己可以信任的数据。通过精心裁量这六种补充性验证策略中哪些适用于每种抗体，我们能够确定抗体在任何指定测定法中的特异性、灵敏度和功能性。这意味着，当选择 CST^® 抗体时，您就获得这种抗体为我公司产品性能保证所涵盖的保证。

我们的抗体构成即用型 FastScan^™、PathScan^® 和 PathScan^® 快速实验步骤 (RP) ELISA 试剂盒的基础，所有这些试剂盒均按夹心测定样式配置，以相比直接和间接 ELISA 而言靶标特异性优异。在设计和生产 ELISA 试剂盒时通过确定最佳抗体对并预先进行所有测定法开发和验证，我们在您项目的整个持续期全程保障您数据的质量。

过去六载作为产品科学家在 CST 工作，我的大部分职责是测试公司 ELISA 试剂盒的批间差异，以确保一致性。科学可重复性是 CST 的核心价值观，这彰显于我们采用严格验证标准的做法中。最终，我们希望客户的研究保持不间断，并让他们信任自己的结果，无论其收到的 ELISA 试剂盒批次如何。通过按照公司既定的标准操作规程 (SOP) 生产每个新批次，我们确保我公司所有 ELISA 试剂盒均展示出研究人员关联于 CST 的一致、可靠性能。

ELISA 试剂盒批次测试要求

任何新的 ELISA 试剂盒批次可提供给研究人员之前，我们都进行一系列全面测试。这些测试起到确认新批次对目的靶标具有高度特异性（低背景信号）、与当前批次相当的灵敏度（相似的检测限）和产生具有宽动态范围的灵敏度曲线的能力。

我们执行的测试类型包括以下：

有阳性对照和阴性对照的测试 

根据 ELISA，用于验证目的的对照可以是生物学相关的样品或靶标蛋白内源水平已知（高和低）的样品。通过用现有和新的 ELISA 试剂盒批次生成显示吸光度信号在不同蛋白质浓度时如何变化的平行滴定曲线，我们可以确认各数据集关联。由于每个模型系统都不同，我们建议客户使用我们的滴定曲线作为指导，确定自己的样品上样蛋白质浓度。

由于我们的 FastScan、PathScan 和 PathScan RP ELISA 试剂盒针对相对（而非绝对）定量做了验证，因此它们不包含标准品。相反，我们建议样品依据蛋白质含量或细胞数标准化。不过，我们确实随同 FastScan 试剂盒提供冻干的阳性对照，以验证分析性能。

光密度 (OD) 信号阈值

对于待通过验证的 ELISA 试剂盒批次，阳性对照样品必须具有大于 1.5 的绝对光密度 (OD) 值，而空白样品的信号阈值应低于 0.3。在测试我们的 PTM 特异性 ELISA 试剂盒时，我们还设置了适当的诱导阈值，以确保磷酰对照样品显示高于阴性非磷酰对照样品的显著信号。

图 1. FastScan™ Cas9 (S. pyogenes) ELISA Kit #29666 的代表性阳性（上图）和阴性（下图）对照批次测试数据。

此外，每个新 ELISA 试剂盒批次必须相对于最高滴定点具有大于 5.0 的的信号/空白比。重要地，该值必须落入类似于现有批次的范围内，以便新批次通过我们的可重复性标准。

图 2. 来自PathScan^® Phospho-SMAD2 (Ser465/467)/SMAD3 (Ser423/425) Sandwich ELISA Kit #12001 批次验证的代表性合格通过信号/空白比数据。

变异系数百分比 (%CV) 值

验证新 ELISA 试剂盒批次时的另一个关键测试参数是 %CV。为了生成该值，我们对新批次中随机选择的三个板条运行滴定曲线，以确定每个重复的均数 (μ) 和标准差 (SD，σ)，然后应用以下公式：

%CV = (σ / µ) x 100

对于待放行的新批次，现有批次与新批次之间的分析间差异必须小于 15%。

图 3. 来自PathScan^® Phospho-SMAD2 (Ser465/467)/SMAD3 (Ser423/425) Sandwich ELISA Kit #12001 批次验证的具有代表性合格通过 %CV 数据。

为了确保我们的 ELISA 试剂盒随时间推移表现出一致性能，同时无信号衰减，我们通常在保质期过半时进行跟进质量控制 (QC) 测试。

为您的下一次 ELISA 实验提供高质量结果

即用型 ELISA 试剂盒可以为您的研究带来许多益处，前提是它们从可靠的制造商获得。您的测定法几乎就是构成测定法的抗体。在 CST，我们使用经严格验证的高质量抗体作为 FastScan、PathScan 和 PathScan RP ELISA 试剂盒的基础，每个新批次在可供给客户之前都经过全面测试。通过核实每个新的 ELISA 试剂盒批次都表现出与先前批次相当的性能，我们旨在确保您的项目按计划进行，而无任何计划外中断。

要确定我公司哪些 ELISA 试剂盒最佳满足您的需求，请访问哪种 CST^® ELISA（酶联免疫吸附测定）试剂盒最适合我？

是否需要消除潜在的供应问题或留存我们的任何一种产品？考虑 CST 作为您的批量 ELISA 试剂盒订单和批次预订合作伙伴。当您批量购买时，我们也可能会提供基于数量的折扣。提交定制制剂申请以了解更多。

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