当涉及小鼠组织样品时,并不是所有的蛋白质印迹法上样对照蛋白都能均衡表达。例如,小鼠心脏中的 β-actin含量相对较低,小鼠小肠中的 GAPDH 含量相对较低。另外,在某些实验条件下,某些上样对照蛋白的蛋白水平可能会受到影响。 例如,在某些组织中,β-actin mRNA 水平会随着胰岛素治疗而改变。
因此,预先进行研究,并确定对样本类型和实验而言最佳的上样对照非常重要。继续阅读这篇博客文章,例如显示各种小鼠组织中常见上样对照蛋白表达水平的蛋白质印迹。
选择小鼠组织蛋白质印迹的上样对照
Cell Signaling Technology (CST) 科学家用蛋白质印迹法检测小鼠组织时是如何准备的呢?我们检查可靠的表达数据库和文献,以在进行蛋白质印迹之前确保组织中表达上样对照蛋白。我们还希望看到该蛋白质的相对丰度来帮助设定期望值。仅仅因为组织表达给定靶标的 mRNA,并不意味着所得蛋白质的量将足够高,可以用蛋白质印迹法检测到。在进行任何印迹之前,请确保特定的上样对照蛋白在组织样本中高表达,这样可以节省宝贵的时间和试剂。
相关资源:蛋白质印迹法疑难排解指南
为了提供帮助,我们已经使用一些常见的上样对照抗体和小鼠组织类型进行了内部检测,以作为您实验的参考。结果总结在下面的参考表中。
不同小鼠组织中的上样对照表达
脑 | 脾 | 肾 | 胰腺 | 睾丸 | 皮肤 | 眼睛 | 心脏 | 肺 | 骨骼肌 | |
α-Tubulin | ✔ | ✔ | ✔ | 低 | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ |
β-Actin | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | 低 | ✔ | ✔ |
β-Tubulin | ✔ | ✔ | ✔ | 低 | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ |
Cox IV | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ |
GAPDH | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ |
组蛋白 H3 | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | 低 | 低 | ✔ | ✔ | ✔ |
β3-Tubulin | ✔ | 低 | 低 | 低 | ✔ | 低 | ✔ | 低 | ✔ | ✔ |
Table: 各种小鼠组织类型中常见上样对照抗体的表达水平。
在下方,您还可以找到蛋白质印迹法示例,显示不同小鼠组织类型的常见上样对照蛋白的表达水平。您还将找到经验证可用于蛋白质印迹法分析的 CST 上样对照抗体列表,以及识别每种小鼠靶标蛋白的抗体简要列表。
有关最新的产品可用性和选择,请查看完整的 CST 产品目录。我们的团队也很乐意回答任何购买问题。
小鼠组织中的 α-微管蛋白上样对照表达
使用 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAB #2125 对不同小鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
用于具有小鼠反应性的蛋白质印迹法的 CST α-微管蛋白抗体:
小鼠组织中的 β-肌动蛋白上样对照表达
注:β-肌动蛋白可被 ASP244 和 GLY245 之间的 caspase-3 裂解,这会产生 32 kDa 片段和 15 kDa 片段。根据抗原的位置,一些 β-肌动蛋白抗体可检测全长 β-肌动蛋白和 32 kDa 片段(也称为 Fraction)。
使用 β-Actin (D6A8) Rabbit mAB #8457 对不同小鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
用于具有小鼠反应性的蛋白质印迹法的 CST β-肌动蛋白抗体:
- β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700
- β-Actin Antibody #4967
- β-Actin (13E5) Rabbit mAb #4970
- β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457
- β-Actin (E4D9Z) Mouse mAb #58169
小鼠组织中的 β-微管蛋白上样对照表达
使用 β-tubulin (9F3) Rabbit mAb #2128 对不同小鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
用于具有小鼠反应性的蛋白质印迹法的 CST β-微管蛋白抗体:
- β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb #2128
- β-Tubulin Antibody #2146
- β-Tubulin (D2N5G) Rabbit mAb #15115
- β-Tubulin (D3U1W) Mouse mAb #86298
小鼠组织中的 COX IV 上样对照表达
使用 COX IV Antibody #4844 对不同小鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
用于具有小鼠反应性的蛋白质印迹法的 CST COX IV 抗体:
- COX IV Antibody #4844
- COX IV (4D11-B3-E8) Mouse mAb #11967
- COX IV (D6I4K) Rabbit mAb (Rodent Specific) #38563
小鼠组织中的 GAPDH 上样对照表达
使用 GAPDH (D16H11) XP Rabbit mAB #5174 对不同小鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
用于具有小鼠反应性的蛋白质印迹法的 CST GAPDH 抗体:
小鼠组织中的组蛋白 H3 上样对照表达
使用 Histone H3 (D1H2) XP Rabbit mAB #4499 对不同小鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
用于具有小鼠反应性的蛋白质印迹法的 CST 组蛋白 H3 抗体:
- Histone H3 (96C10) Mouse mAb #3638
- Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb #4499
- Histone H3 Antibody #9715
- Histone H3 (3H1) Rabbit mAb #9717
- Histone H3 (1B1B2) Mouse mAb #14269
小鼠组织中的 β3-微管蛋白上样对照表达
使用 β3-Tubulin (D65A4) XP Rabbit mAB #5666 对不同小鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
用于具有小鼠反应性的蛋白质印迹法的 CST β3-微管蛋白抗体:
- β3-Tubulin (TU-20) Mouse mAb #4466
- β3-Tubulin (D71G9) XP® Rabbit mAb #5568
- β3-Tubulin (D65A4) XP® Rabbit mAb #5666
仍然不确定哪种抗体最适合您的实验步骤?请随时联系 CST 技术支持,获得有关选择抗体或设置实验的建议。我们期待帮助您选择最佳的实验抗体!
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