研究综述：文献中的 CST^® 抗 CAR 接头抗体

针对胶质瘤的 EphA3 CAR-T 细胞可产生治疗性记忆 T 细胞反应

Lertsumitkul 等人。(JITC 2024) | DOI: 10.1136/jitc-2024-009486

本研究描述了对针对 Ephrin A 型受体 3 (EphA3) 的第二代 CAR-T 细胞疗法的评估，作者在高级别​​胶质瘤（包括胶质母细胞瘤和弥漫性中线胶质瘤）中发现了该疗法。由于具有肿瘤特异性靶向性和穿透血脑屏障的能力，针对 EphA3 的 CAR-T 细胞疗法在体外和体内表现出强大的疗效，并在小鼠模型中实现了肿瘤清除。研究还发现，针对 EphA3 的 CAR-T 细胞可以产生长期免疫记忆，从而防止再次治疗时肿瘤复发。

用例：

定量：为了确定 T 细胞转导效率，采用 G4S Linker (E7O2V) Rabbit mAb 克隆来确认 EphA3 靶向 CAR-T 细胞的存在和扩增。

合成免疫检查点接合剂可保护 HLA 缺陷型 iPSC 及其衍生物免受先天免疫细胞毒性

Gravina 等人（Cell Press 2023）| DOI：10.1016/j.stem.2023.10.003

该研究的作者设计并测试了一类新型合成细胞表面分子（接合剂），可激活免疫细胞中的免疫检查点并抑制细胞毒性。具体来说，作者设计并测试了针对免疫检查点 SIRPa、TIM3 和 LILRB1 的接合剂，以防止来自 NK 细胞和巨噬细胞的细胞毒性免疫攻击。该方法旨在帮助保护同种异体免疫肿瘤学或再生细胞疗法免受排斥并提高其功效。

用例：

检测： G4S Linker (E7O2V) Rabbit mAb (Alexa Fluor^® 647 Conjugate) #69782 用于在流式细胞术分析中检测和量化接合剂表面表达，该分析检查了工程接合剂与其靶标分子结合之前和之后的表达动态。 

检测： 流式细胞术测定中使用生物素化的抗 G4S 接头 F(ab’)₂ 片段来评估使用表达合成转基因 (SIRPa-E 和 CD64t) 的 B2M 敲除 iPSC 进行工程免疫逃避的可行性。

评估抗 CAR 连接 mAb 在 BiTE/bsAbs 和 CAR T 细胞预处理后对 CAR T 进行监测的情况

Grahnert 等人（Biomedicines 2024）| DOI：10.3390/biomedicines12081641

本研究考察了使用抗 CAR 接头抗体监测接受双特异性抗体 (bsAb) 或双特异性 T 细胞接头 (BiTE) 治疗的患者的 CAR-T 细胞疗法的效果。当 CAR-T 细胞和 bsAbs/BiTE 都针对相同抗原时，传统的基于抗原的 CAR 检测方法会产生假阳性。研究人员分析了含有目前批准用于临床的所有 BCMA 和 CD19 靶向 CAR-T 细胞产品的样本，以证明抗 CAR 接头 mAb 提供了一种高度特异性的检测方法，且不受 BiTE 或 bsAb 治疗的影响。然而，不同临床可用的 CAR-T 细胞疗法的敏感性有所不同。

用例： 

检测： 发现 CST 抗 CAR 接头抗体对用 Idecel、Tisa-cel、Axi-cel、Brexu-cel 和 Liso-cel 处理的血液样本中的 CAR-T 细胞检测具有高度敏感性和特异性，从而提供了一种可靠的方法来区分 CAR-T 细胞染色与使用基于抗原的检测方法时同时检测免疫细胞接头引起的背景染色。然而，抗 CAR 接头 mAb 无法检测到 Cilta-cel（含有 G4S-CAR 接头）。

CD8α结构域增强 GUCY2C CAR-T 细胞疗效

Baybutt 等人（2024 年癌症生物学与治疗） | DOI: 10.1080/15384047.2024.2398801

本研究检查了工程化 CAR 细胞的铰链和跨膜结构域，以确定不同的构建体如何影响 CAR 在实体肿瘤免疫疗法中的表现。具体来说，研究人员比较了针对结直肠癌的 GUCY2C 靶向 CAR 设计中来自 CD8ɑ 或 CD28 分子的铰链和跨膜结构域。研究人员发现，虽然结构域不会导致抗原独立的背景差异，例如 CAR 表达、分化和耗竭表型，但 CD8ɑ 结构域 CAR 对靶标表现出更大的亲和力。

用例：

检测：G4S Linker (E7O2V) Rabbit mAb (PE Con​​jugate) #38907 用于流式细胞术检测和定量 CAR 表面表达。还使用 Protein L 检测了表面表达，结果与使用接头抗体获得的结果相同。

检测：G4S Linker (E7O2V) Rabbit mAb (Alexa Fluor^® 488 Conjugate) #50515 用于两个不同的流式细胞术实验，以标记和识别 CAR+ T 细胞：

• 细胞内流式细胞术实验，其中细胞被通透以测量细胞因子的产生
  
• 通过细胞表面标记物分析来确定 T 细胞表型，从而确定记忆状态并检测衰竭标记物