什么产生单克隆抗体、多克隆抗体或重组抗体？

当您购买抗体时，有太多因素需要考虑。例如，它会在我的细胞或组织模型中起作用吗？它是否在我想要使用的应用中经过了测试？有时，由于选择有限，很难找到所需的东西，但在其他情况下，可能有几种试剂似乎可以在您的实验中起作用。

单克隆抗体、多克隆抗体或重组抗体

如果您正在寻找针对同一靶点的单克隆、多克隆或重组抗体，又是什么情况呢？区别是什么？其中一个比另一个好吗？还是它们都是为不同目的而设计的？这是一个复杂的问题，但绝对值得一问。

什么是多克隆抗体？

多克隆抗体是从不同 B 淋巴细胞群体衍生的检测相同免疫原内部不同表位的抗体的异质混合物。多克隆抗体通常在兔中产生，但也可以在有蹄类动物（绵羊、山羊、马等）、啮齿类动物和鸡中产生，这取决于研究人员的需求。多克隆抗体的产生通常涉及从免疫过的动物收集血液、分离免疫球蛋白级分以及亲和纯化以去除非特异性抗体群体。兔由于其更大的抗体多样性和产生针对多种抗原（包括具有或不具有翻译后修饰的小分子和肽）的免疫应答的能力而具有超越其他种属的显著优势。

什么是单克隆抗体？

单克隆抗体是从单个 B 细胞克隆衍生的检测免疫原内部单一表位的均一抗体。所有单克隆抗体都始于多克隆抗体池，但通过选择或克隆过程加以分离，以鉴定和扩充所需的单价克隆。单克隆抗体通常从啮齿类宿主、兔和骆驼科动物产生，并根据所需抗体的种属和类型，通过多种方法产生（如下详述）。

传统上，通过注射和从小鼠收集腹水或培养表达抗体的 B 细胞并收集上清液，借助永生化 B 细胞的稳定克隆产生单克隆抗体。最近，新技术已经能够从免疫反应性 B 细胞中重组克隆免疫球蛋白重链和轻链基因，从而在哺乳动物细胞系中表达和产生重组单克隆抗体。

抗体生产

如上所述，有许多产生抗体的方法。通常，从免疫动物的血清中纯化多克隆抗体。可以使用许多不同的策略来生产单克隆抗体。大多数单克隆抗体通过培养产生抗体的 B 细胞杂交瘤并从细胞收集上清液来产生。取决于抗体滴度和亲和力，以这种方式产生的抗体可以在额外纯化或无额外纯化下使用。

替代方法包括将 B 细胞杂交瘤注射到合适宿主的腹膜腔内，并在一段时间后收集腹水。该方法具有快速产生大量抗体的优点，但是具有需要动物宿主的缺点，并且可能需要额外的纯化步骤去除脂质和其他残片。

或者，可以将单克隆抗体的重和轻免疫球蛋白链克隆到表达载体中，转染到适合抗体生产的哺乳动物细胞系中，并异位表达以收集和纯化。抗体的重组生产由于其固有的一致性和基因改造抗体的能力，在抗体制造商中正在成为增长的趋势。

无论克隆性或生产方法如何，所有抗体都必须在用于实验之前在预期的应用中适当地加以验证。即使是最好的抗体，无论克隆性、宿主物种或同种型如何，在使用不当时都可能产生虚假或误导性结果。